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        CRISPR-CAS9基因編輯

         發布時間:2019/3/5 點擊量:1200

        CRISPR-Cas9 是近年興起的用于靶向基因組特定位置,進行DNA修飾的重要工具。研究發現CRISPR是細菌為了應對病毒的攻擊而演化而來的獲得性免疫防御機制。具體來說,在CRISPR和Cas9的作用下,經由小RNA分子的引導,靶向并沉默入侵者遺傳物質核酸的關鍵部分。在該系統中,crRNA(CRISPR-derived RNA)與tracrRNA(trans-activating RNA)結合形成的復合物能特異性識別靶基因序列,并引導Cas9核酸內切酶在靶定位點剪切雙鏈DNA,隨后,細胞的非同源末端連接修復機制(NHEJ)重新連接斷裂處的基因組DNA,并引入插入或缺失突變。另外也可以提供一個外源雙鏈DNA供體片段(Donor)通過同源重組(HR)整合進斷裂處的基因組,從而達到對基因組DNA進行修飾的目的。
        目前,CRISPR-Cas9系統的基因組編輯功能已被應用于多種生物,包括小鼠、大鼠、斑馬魚、秀麗隱桿線蟲,也包含多種細菌和植物,甚在人體上也有應用。


         
        基因編輯與RNA干擾的區別

        方法

        靶標

        質粒構建

        基因表達

        基因敲除

        基因定點突變

        基因組改變

        遺傳密碼子改變

        遺傳性

        RNAi

        mRNA

        (轉錄水平)

        簡單

        下調

        否 

        可借助病毒實現

        CRISPR-CAS9

        DNA序列(基因組水平)

        簡單

        敲除

        TALEN

        DNA序列(基因組水平)

        復雜

        敲除

        基因編輯技術優勢
        1、操作簡單,靶向性高。
        2、可實現對靶基因特定位點定點敲除。
        3、可同時對多個靶基因進行敲除。
        4、可應用于任何物種。
        5、CRISPR-Cas9系統是由RNA調控的對DNA的修飾,可穩定遺傳。
        服務項目
        普通載體、Cas9/Donor腺病毒顆粒、Cas9慢病毒顆粒
        定制gRNA和HR供體載體
        基因敲除細胞株
        Gene Knock-Out,Knock-in或Gene標記
        客戶需要提供材料
        1、物種、基因名稱或者基因ID;
        2、提供靶細胞。
        服務流程
        1、提交項目課題相關需求和資料。
        2、與我們的專業技術團隊討論項目細節。
        3、根據討論后的意見對實驗方案進行修改。 
        4、雙方均滿意并達成一致,簽訂技術服務合同。
        5、開展實驗,按期完成合同規定的內容。
        6、結題,提供實驗原始結果和分析結果、實驗流程、實驗條件等等。
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